特級胎牛血清在細胞培養(yǎng)中是重要的添加劑，但使用過程中常常會遇到沉淀產(chǎn)生、細胞污染以及批次間差異等問題。以下是一些應對這些問題的技巧和建議。
沉淀產(chǎn)生的應對技巧
沉淀產(chǎn)生的原因：沉淀物的出現(xiàn)通常是由于胎牛血清中的脂蛋白、纖維蛋白等成分在溫度變化或處理過程中發(fā)生變性聚集所致。例如，溫度改變過大(如從-20℃直接放入37℃解凍)、血清放置時間過長、反復凍融、熱滅活處理不當?shù)榷伎赡軐е鲁恋碓黾印?/div>
應對方法：
優(yōu)化解凍過程：建議從低溫冰箱取出后，先于2~8℃冰箱放置12~24小時部分溶解，再于室溫下全溶，期間需規(guī)則搖晃均勻。避免直接將-20℃的血清放入水浴中，防止溫差過大導致沉淀。
離心去除沉淀：如需去除沉淀，可將血清分裝至無菌離心管內，以400~600g離心5分鐘，取上清液用于培養(yǎng)。不建議過濾去除沉淀，以免阻塞濾膜并導致血清營養(yǎng)成分流失。
減少凍融次數(shù)：每次凍融可能析出5%~10%的沉淀，建議分裝后單次使用，減少凍融次數(shù)。
避免熱滅活：如非必要，不建議對血清進行熱滅活。若必須熱滅活，應嚴格遵守56℃、30分鐘的原則，并隨時搖晃均勻。
細胞污染的預防措施
污染的判斷：磷酸鈣沉淀常被誤認為是微生物污染，但實際并非如此。如果懷疑血清被污染，建議將血清加到瓊脂板上進行培養(yǎng)，或進行革蘭氏染色，在油鏡下觀察以確認是否為微生物污染。
預防措施：
規(guī)范操作流程：在細胞培養(yǎng)過程中，嚴格遵守無菌操作規(guī)程，避免污染。
正確保存血清：需長期保存的血清應儲存于-15℃或更低溫冰箱中，避免反復凍融。
避免長期室溫放置：血清在2~8℃冰箱存放時間請勿超過1個月，避免在室溫下放置時間過長。
批次間差異的控制方法
批次間差異的原因：由于胎牛血清來源于動物，其成分復雜且存在不確定性，不同批次的血清在組分和含量上可能存在差異。
控制方法：
選擇優(yōu)質供應商：優(yōu)先采購經(jīng)過嚴格質量檢測的血清，并要求供應商提供批次質檢報告。
記錄并重復購買優(yōu)質批次：如果某一特定批次的血清使用效果良好，建議記錄該批次信息，并在后續(xù)購買時指定該批次。
提前測試新批次：在更換不同批次或產(chǎn)地的血清時，建議先訂購少量進行試用，確保其與現(xiàn)有細胞培養(yǎng)體系兼容。
通過以上方法，可以有效應對特級胎牛血清在使用過程中出現(xiàn)的沉淀、細胞污染以及批次間差異等問題，從而提高細胞培養(yǎng)的成功率和重復性。
歡迎進入柏萊源（天津）生物科技有限公司網(wǎng)站！
13302035784
更新時間：2026-01-23
點擊次數(shù)：165
當前位置：